人c-jun elisa试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
ASTE1    ASTE1蛋白抗体
phospho-APG4B(Ser309)    磷酸化自噬相关蛋白4B抗体
AFAP    微丝相关蛋白1抗体
ADORA1    腺苷A1A受体抗体
ARSB    芳基硫酸酯酶B抗体
A2BP1    共济失调蛋白2结合蛋白1抗体
ADAM17    肿瘤坏死因子α转换酶
ARNT2     芳香烃受体核转录蛋白2抗体
ABH8    AlkB同源蛋白8抗体
ABI3BP    ABI基因家族成员3结合蛋白抗体
ARHGAP20    Rho GTP酶激活蛋白20抗体
ASB10    含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体
Axin 2    轴抑制蛋白2抗体
ANGPTL6    血管生成素相关蛋白6抗体
AMH    Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体
EphA8    酪氨酸蛋白激酶受体A8抗体
Acetoacetyl-CoA synthetase    脂肪酰辅酶A家族成员1抗体
ARNTL2    芳香烃受体核转录蛋白样2抗体
phospho-AANAT (Thr29)    磷酸化芳香胺N-乙酰化转移酶抗体
ABLIM1    肌动蛋白结合蛋白1抗体