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髓核细胞生长因子5mL使用实验步骤
发布时间:2023-02-13 16:51 | 点击次数:
髓核细胞生长因子5mL使用实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::戊醇(25:24:1)抽提两次,戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)髓核细胞生长因子5mL
小鼠载脂蛋白A1(Apo A1)ELISA试剂盒
小鼠孕酮受体(PROGR)ELISA试剂盒
小鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒
小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒
小鼠诱导型一氧化合成酶(iNOS)ELISA试剂盒
小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒
小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒
小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒
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小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒
小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒
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小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)ELISA试剂盒
小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA试剂盒
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小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒
小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒