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木质素含量测试盒紫外分光光度法操作步骤

发布时间:2022-09-05 16:54 |  点击次数:

木质素含量测试盒紫外分光光度法操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
小鼠组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒
小鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒
小鼠组织蛋白酶G(CTSG)ELISA试剂盒
小鼠组织蛋白酶D(CTSD)ELISA试剂盒
小鼠组织蛋白酶A(CTSA)ELISA试剂盒
小鼠组蛋白脱乙酰基酶4(HDAC4)ELISA试剂盒
小鼠组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)ELISA试剂盒
小鼠组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)ELISA试剂盒
小鼠组蛋白H4(H4)ELISA试剂盒
小鼠组蛋白H3(H3)ELISA试剂盒
小鼠组蛋白H2B(H2B)ELISA试剂盒
小鼠组蛋白H2A(H2A)ELISA试剂盒
小鼠组胺H4受体(HRH4)ELISA试剂盒
小鼠组氨酸丰富糖蛋白(HRG)ELISA试剂盒
小鼠阻抑素(PHB)ELISA试剂盒
小鼠足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒
小鼠棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA试剂盒
小鼠自身免疫调节因子(AIRE)ELISA试剂盒
小鼠转运蛋白1(TNPO1)ELISA试剂盒
小鼠转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒
小鼠转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒