IRE1α RNase激酶抑制剂(KIRA6)培养操作

IRE1α RNase激酶抑制剂(KIRA6)培养操作：

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
      
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA试剂盒
胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA试剂盒
胃蛋白酶(PP)ELISA试剂盒
胃蛋白酶(PG)ELISA试剂盒
胃蛋白酶(GT)ELISA试剂盒
未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒
尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)ELISA试剂盒
尾加压素2(UST2)ELISA试剂盒
维生素K依赖蛋白Z(PROZ)ELISA试剂盒
维生素K1(VK1)ELISA试剂盒
维生素H(VH)ELISA试剂盒
维生素E(VE)ELISA试剂盒
维生素D受体(VD R)ELISA试剂盒
维生素D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒
维生素D3(VD3)ELISA试剂盒
维生素D2(VD2)ELISA试剂盒
维生素D(VD)ELISA试剂盒
维生素C(VC)ELISA试剂盒
维生素B6(VB6)ELISA试剂盒
维生素B3(VB3)ELISA试剂盒
维生素B2(VB2)ELISA试剂盒
维生素B12(VB12)ELISA试剂盒