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乳酸乳球菌探针法荧光定量PCR试剂盒样品RNA的抽提步骤

发布时间:2022-01-17 16:32 |  点击次数:293

乳酸乳球菌探针法荧光定量PCR试剂盒样品RNA的抽提:

①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lv仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lv仿相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。

③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
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④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
凯尔血型糖蛋白CD238抗体
嗜乳脂蛋白亚家族2成员A2抗体
骨形态发生蛋白10抗体
溴脱氧尿苷单克隆抗体
BEND2蛋白抗体
骨涎蛋白
副溶血性弧菌菌体鞭毛蛋白抗体
BTBD6蛋白抗体
BMP内皮细胞调节蛋白抗体
丙肝病毒NS5A反转录蛋白8抗体
骨形态发生蛋白1/胶原C蛋白肽链内切酶抗体
骨形态发生蛋白9抗体
微管蛋白β辅助因子D抗体
钙粘蛋白相关蛋白受体BTR1抗体
有丝分裂蛋白BUB3抗体
p60TRP蛋白抗体
博莱霉素水解酶抗体
短蛋白聚糖抗体
BTB/POZ结构域蛋白3抗体
巴尔得-别德尔综合征相关蛋白12抗体
碱性亮氨酸拉链蛋白BZW1抗体
骨形态发生蛋白受体1B抗体
Bcl2相互作用蛋白1抗体
骨形态发生蛋白5抗体
骨形态发生蛋白15抗体
 

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