马免疫球蛋白Eelisa检测试剂盒操作步骤

马免疫球蛋白Eelisa检测试剂盒操作步骤:
       
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
薄荷
槟榔
紫苏叶
黄连（三角叶黄连）
益母草
荆芥
吴茱萸
连翘
红花
血竭(麒麟竭)
白芍
甘草
牛蒡子
唐古特大黄
丁公藤
17-氢-9-去氢穿心莲内酯-19-硫酸
牛皮特征肽A
808猩红
松香酸
银杏内酯K
生脉提取物
桃叶干浸膏
狼毒乙素
3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇
参麦提取物
蓖麻油酸
蓖麻油酸甲酯
毛蕊异黄酮葡萄糖苷
西贝母碱苷（暂行）
木蝴蝶苷B
木通苯乙醇苷B（荷苞花苷B）
人参皂苷Ro
穗花杉双黄酮
芫花素（暂行）
对羟基苯乙酮
细辛脂素
紫萁酮
太子参环肽B
旱莲苷A
（±）原苏木素B
巴西苏木素（暂行）
α-常春藤皂苷
洋艾素
阿多尼弗林碱
石斛碱
石斛酚
水晶兰苷
斯皮诺素
长梗冬青苷
大戟二烯醇
马钱苷酸
竹节参皂苷Ⅳa（暂行）
杨梅苷
伪原薯蓣皂苷（暂行）
槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-
王不留行黄酮苷
宝藿苷Ⅰ
远志口山酮Ⅲ
细叶远志皂苷
3，6-二芥子酰基蔗糖（暂行）
23-乙酰泽泻醇B
麦角甾醇
5-甲基蜂蜜曲霉素
川楝素
知母皂苷BII
1-甲基海因
6-姜辣素
苷松新酮