1型脊髓灰质炎病毒(PV-1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)反应五要素

1型脊髓灰质炎病毒(PV-1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
叙利亚仓鼠肾细胞；BHK-21
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1
二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞；CHO/dhFr-
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-C
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-E1
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-E2
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-p7
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-NS2
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-NS3
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-NS4A
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-NS4B
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-NS5A
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-HCV-NS5A
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO 1beta9,12.5 Clone 36
叙利亚仓鼠细胞系；Syrian Hamster AV12
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6
中国仓鼠卵巢细胞系；CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO Hu 164 SCF 17
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA