胶质细胞谷氨酸运载蛋白2抗体的生物素化标记实验要点

胶质细胞谷氨酸运载蛋白2抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼suan缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯fen基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
α弹性蛋白抗体
黄热病毒包膜糖蛋白抗体
HER2受体抗体
转录因子E2F-4抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化埃兹蛋白抗体
磷酸化埃兹蛋白抗体
磷酸化细胞转录因子ELK1抗体
磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受体抗体
Ephrin B抗体
磷酸化Ephrin B抗体
磷酸化Ephrin B抗体
磷酸化Ephrin B抗体
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磷酸化雌激素受体α抗体
磷酸化雌激素受体α抗体
表皮生长因子受体底物8抗体
内皮素1抗体
肠道病毒71型/手足口病病毒抗体
丝裂原活化蛋白激酶1抗体