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甘油三酯(TG)含量测定样本的前处理

发布时间:2021-08-26 16:30 |  点击次数:1275

甘油三酯(TG)含量测定样本的前处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1、 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三,用冰浴匀浆器
或研钵匀浆。
2、 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
3、 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心 10min。
4、 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的 α-KGDH(此步可选做)。
5、 在步骤④的沉淀中加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率 20%或
200W,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次),用于线粒体 α-KGDH 活性测定。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定
(1)在试剂五中加入 18mL 试剂四充分溶解,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)
水浴 10min;现配现用;
(2)在试剂六中加入 1mL 蒸馏水,充分溶解待用;现配现用;
(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、10μL 试剂六和 180μL 试剂五,混
匀,立即记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 2min20s 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。
溶血磷脂酸受体蛋白2抗体
溶血磷脂酸受体蛋白3抗体
内皮细胞的分化蛋白6抗体
外生性骨疣样蛋白2抗体
磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
内皮细胞特异性分子1抗体
真核翻译起始因子3F抗体
真核翻译起始因子3H抗体
真核翻译起始因子4G抗体
β4整合素结合蛋白抗体
食道癌相关基因4蛋白抗体
红细胞生成素抗体
胞浆环氧化物水解酶抗体
雌激素受体相关蛋白3抗体
雌激素相关受体β抗体
上皮细胞膜蛋白2抗体
甲基固醇羟化酶单加氧酶1抗体
端粒酶结合蛋白EST1A抗体
组蛋白赖氨酸N-甲基EZH1抗体
上皮间质相互作用蛋白1抗体
雌激素诱导基因121蛋白抗体
内皮粘蛋白EMCN抗体
细胞骨架连接质膜蛋白抗体
吞噬细胞运动蛋白1抗体
酪氨酸蛋白激酶受体A10抗体

 

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