黄胸鼠肺成纤维细胞；YCR复苏操作要点

黄胸鼠肺成纤维细胞；YCR复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
TG1 电转感受态细胞
EPI400 电转感受态细胞
EPI400 电转感受态细胞
K12 电转感受态细胞
K12 电转感受态细胞
BL21感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21(DE3)感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21(DE3)感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21(DE3)pLysS感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21(DE3)pLysS感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21(AI)感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21(AI)感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21 Star(DE3)感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21 Star(DE3)感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21-Star(DE3)pLysS感受态细胞(化学转化法或热激法） 
BL21-Star(DE3)pLysS感受态细胞(化学转化法或热激法） 
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受态细胞(化学转化法或热激法）
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受态细胞(化学转化法或热激法）
Rosetta(DE3)感受态细胞(化学转化法或热激法）