L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)常见样本处理方法

L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测定原理：Gal LDH 催化L-半乳糖内酯还原细胞色素c（Cyt c），还原型Cyt c 在550nm 有吸收峰。测定还原型Cyt c 增加速率，来计算Gal LDH 活性。
测定意义：L-半乳糖途径是合成AsA 的主要途径。Gal LDH 位于线粒体内膜，负责催化植物体内AsA 生物合成的最后一步，也是该途径的关键酶之一，对植物体内AsA 含量的积累起着至关重要的作用。
   
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。

2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。

3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。

4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。

5、再现性好：变异系数CV=1.7%。

6、回收试验： X =103.3%。

7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。

8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
     
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。

2、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量

（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议 500万细菌或细胞加入 1mL提取液） ，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声 3s，间隔10s，重复30 次）8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，

加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测
自备仪器和用品：台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
在分析复杂样品时，如何消除干扰？
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒100管/96样说明书消除干扰方法主要有：
1、加入眼笔记，如加入配位掩蔽剂，使其与干扰离子生成测定波长物吸收的配合物，如加入氧化还原掩蔽剂，改变干扰离子的价态。
2、选择适宜的显色条件，如控制溶液的酸度等，使干扰离子与显色剂不发生反应。3、采用双波长或其他选择性的方法；
4、分离干扰离子。