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公司新闻
汉扎洛瓦病毒PCR检测试剂盒反应五要素
发布时间:2021-03-11 16:11 | 点击次数:283
汉扎洛瓦病毒PCR检测试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
生物素ELISA试剂盒 Biotin ELISA Kit
三聚氰胺ELISA快速ELISA试剂盒 Melamine ELISA Kit
鸟类催乳素(PRL/LTH)ELISA试剂盒 Avian Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit
鸟H5N1 IgG抗体ELSIA 试剂盒 Bird influenza A virus subtype H5N1 IgG antibody ELISA Kit
猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒 Rhesus macaque bone-specific alkphase B,ALP-B ELISA Kit
家蚕卵黄蛋白(LT)ELISA试剂盒 Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit
鲫鱼卵黄蛋白原(VTG)ELISA试剂盒 Crucian Vitellogenin,VTG ELISA Kit
核黄素转运因子3(RFT3)ELISA试剂盒 Human riboflavin transporter 3,RFT3 ELISA Kit
核黄素转运因子2(RFT2)ELISA试剂盒 Human riboflavin transporter 2,RFT2 ELISA Kit
核黄素转运因子1(RFT1)ELISA试剂盒 Human riboflavin transporter 1,RFT1 ELISA Kit
核苷二磷酸激酶A(NDPK-A)ELISA试剂盒 Nucleoside diphosphokinase A,NDPK-A ELISA kit
蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(Vtg)ELISA试剂盒 Nasoniavitripennis vitellogenin,Vtg ELISA Kit
大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)ELISA试剂盒 Escherichia coli protein,E.coli P ELISA kit
Zeranol(玉米赤霉醇)ELISA试剂盒 Zeranol ELISA Kit
Trenbolone(仑诺)ELISA试剂盒 Trenbolone ELISA Kit
Sulphaquinoxaline(磺胺喹噁林)ELISA试剂盒 Sulphaquinoxaline ELISA Kit
Sulphamethazine(磺胺二甲嘧啶)ELISA试剂盒 Sulphamethazine ELISA Kit
Sulphadiazine(磺胺嘧啶)ELISA试剂盒 Sulphadiazine ELISA Kit
Stanozolol(康力龙)ELISA试剂盒 Stanozolol ELISA Kit
Rat Ficolin-2(FCN2)ELISA试剂盒 Rat FCN2 ELISA Kit
Ractopamine(莱克多巴胺)ELISA试剂盒 Ractopamine ELISA Kit
Quinolones(喹诺酮类)ELISA试剂盒 Quinolones ELISA Kit
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
生物素ELISA试剂盒 Biotin ELISA Kit
三聚氰胺ELISA快速ELISA试剂盒 Melamine ELISA Kit
鸟类催乳素(PRL/LTH)ELISA试剂盒 Avian Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit
鸟H5N1 IgG抗体ELSIA 试剂盒 Bird influenza A virus subtype H5N1 IgG antibody ELISA Kit
猕猴骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒 Rhesus macaque bone-specific alkphase B,ALP-B ELISA Kit
家蚕卵黄蛋白(LT)ELISA试剂盒 Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit
鲫鱼卵黄蛋白原(VTG)ELISA试剂盒 Crucian Vitellogenin,VTG ELISA Kit
核黄素转运因子3(RFT3)ELISA试剂盒 Human riboflavin transporter 3,RFT3 ELISA Kit
核黄素转运因子2(RFT2)ELISA试剂盒 Human riboflavin transporter 2,RFT2 ELISA Kit
核黄素转运因子1(RFT1)ELISA试剂盒 Human riboflavin transporter 1,RFT1 ELISA Kit
核苷二磷酸激酶A(NDPK-A)ELISA试剂盒 Nucleoside diphosphokinase A,NDPK-A ELISA kit
蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(Vtg)ELISA试剂盒 Nasoniavitripennis vitellogenin,Vtg ELISA Kit
大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)ELISA试剂盒 Escherichia coli protein,E.coli P ELISA kit
Zeranol(玉米赤霉醇)ELISA试剂盒 Zeranol ELISA Kit
Trenbolone(仑诺)ELISA试剂盒 Trenbolone ELISA Kit
Sulphaquinoxaline(磺胺喹噁林)ELISA试剂盒 Sulphaquinoxaline ELISA Kit
Sulphamethazine(磺胺二甲嘧啶)ELISA试剂盒 Sulphamethazine ELISA Kit
Sulphadiazine(磺胺嘧啶)ELISA试剂盒 Sulphadiazine ELISA Kit
Stanozolol(康力龙)ELISA试剂盒 Stanozolol ELISA Kit
Rat Ficolin-2(FCN2)ELISA试剂盒 Rat FCN2 ELISA Kit
Ractopamine(莱克多巴胺)ELISA试剂盒 Ractopamine ELISA Kit
Quinolones(喹诺酮类)ELISA试剂盒 Quinolones ELISA Kit


