扩增曲线异常这个问题可能涉及到多种原因

 扩增曲线异常这个问题可能涉及到多种原因，主要可以归结为以下几 种
扩增曲线不光滑

主要有两个原因：

一是扩增信号太弱，经系统矫正后，就产生这样抖啊抖的线，小编建议大家提高模板浓度重复实验。

二是仪器本身的问题，可能在扩增过程中仪器出现了波动或者本身该检测孔出现了异常。
PCR试剂 扩增曲线断裂或下滑
比较典型的曲线下滑如上图所示，主要原因是模板浓度太高了，在基线期内就起峰了，仪器会默认起峰的线条仍为基线部分，将扩增曲线往基线位置下拉，因此你的曲线就趴下来啦～
这种情况大家也不要慌，可以减小基线终点（例如基线期默认 3 - 15 个循环，改为 3 - 10 个循环），重新分析数据，一般都能得到一个比较好的结果。
                                             
个别扩增曲线骤降
这是比较常见的一个问题，反应管内若留有气泡，温度升高后会导致气泡破裂，使仪器检测到的荧光值突然降低。所以大家进行扩增反应之前，一定要仔细检查反应管内是否有气泡残留。
扩增曲线呈锯齿状且不连续
这个可以参考上图，这是典型的 ROX 添加不当导致的异常结果，曲线杂乱。大家首先可以尝试去掉 ROX 分析数据，看一下重复性是否 OK（复孔间 STD<0.2），如果还是不行，只能下次实验的时候注意千万不要加错 ROX！
                                                              
无扩增或 CT 值很大
检查一下你所用的酶是否为化学修饰的热启动酶，预变性时间至少 5 min，如果是高 GC 的模板，可以延长预变性时间至 10 min，预变性时间不够，会导致酶活未完全释放，酶活释放不好，那扩增效率肯定就不行啦，所以大家在用 qPCR 试剂的时候，一定要注意分辨热启动酶的封闭手段哦～
反应结束无扩增曲线出现