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血液直接PCR主混合物注意事项

发布时间:2020-04-14 15:09 |  点击次数:686

    血液样品直接PCR预混液(2X),是一种使用特别便捷的专门用于血液样品2倍浓度的PCR预混液,并且PCR结束后可以直接上样电泳无需添加上样缓冲液。,这是一种经过基因工程改造的非常高效的适用于EDTA、肝素或柠檬酸钠抗凝血样品或干血斑样品直接PCR检测的耐热DNA聚合酶。
    对于全血样品可以直接PCR检测,无须提取DNA。本产品对人、小鼠等全血中血红素等各种PCR抑制剂表现出超强的抗性,对于新鲜采集的、4℃保存或低温冻存EDTA、肝素或柠檬酸钠抗凝的人或小鼠血液样品或者干血斑(如whatman903或FTA采血卡上的干血斑),都无需进行DNA提取纯化,可以直接用于PCR扩增目的DNA。
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血液直接PCR主混合物注意事项:
由于PCR反应非常灵敏,在使用 血液直接PCR主混合物(2倍)时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
抗凝血的推荐用量为PCR体系总体积的5-10%左右,可以直接添加到PCR体系中,无需进行任何额外处理。
PCR反应结束之后,建议3000-5000g离心3-5min以沉淀血细胞碎片,便于吸取上清用于电泳分析等。注意:由于抗凝血本身的原因,PCR结束后在PCR管底部会出现透明凝胶状物质,此为正常现象。

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