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小鼠细胞分选方法

发布时间:2018-10-29 10:01 |  点击次数:715

      这种新一代的分选试剂盒是基于RapidSphere™技术,目前可分选小鼠B细胞、T细胞、CD4+、CD8+、初始CD4+、记忆CD4++及初始CD8+ T细胞。分选出的细胞未经标记,纯度高达98%,可立即用于下游的应用。

      大家一定很好奇,这是如何实现的。其实,这个细胞分选平台是以的四聚体抗体复合物(TAC)为基础的。每个TAC由两个小鼠IgG单克隆抗体构成,再通过两个大鼠抗小鼠IgG单克隆抗体连接成为高度稳定的四聚体结构。其中一个小鼠单克隆抗体识别特定的细胞表面抗原,而另一个小鼠单克隆抗体识别葡聚糖包被的磁珠或红细胞。当样品被置于EasySep™磁极上时,磁性标记的细胞(正选部分)仍保留在管内,而未触碰的细胞(负选部分)可被倒入新管中。

    在EasySep™小鼠细胞分选试剂盒中,不想要的细胞由生物素化的抗体和链霉亲和素包被的磁珠负责去除。当样品管置于磁极中时,标记的细胞被拉到管子的侧面,而您所需的细胞就被倒入新管中。分选出的细胞不结合任何抗体和磁珠,完全不影响下游的各种细胞功能分析或分子生物学检测。

      整个操作流程也极为简单。首先,加入EasySep™分选试剂,孵育10分钟;之后,将EasySep™ RapidSphere™加入单细胞悬液中,孵育2.5分钟;再将试管置于磁极中2.5分钟;*后将所需细胞倒入新试管中,就大功告成了。

纯度如何,让数据来说话。下面就是从小鼠脾细胞中分选B细胞的结果。一般来说,B细胞在分选出的组分中通常占了94%-98%。

     与其他的分选试剂盒相比,使用RapidSphere™分选细胞每次*多可节省45分钟的时间。有意思的是,STEMCELL的网站上还有个在线计算器,能帮您算算每年在细胞分选上可以节省多少时间。

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