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介绍原代细胞纯化过程

发布时间:2018-09-12 14:09 |  点击次数:734

       体外培养的细胞绝大多数都呈混合生长,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性和可重复性,要求采用单一种类细胞来进行实验,因而培养细胞的纯化就成为实验研究的重要一步。细胞的纯化分为:自然纯化和人工纯化。自然纯化是指长期传代过程中靠自然淘汰法,不断排挤其他生长慢的细胞,最后留下生长优势旺的细胞,达到细胞纯化的目的。人工纯化是指利用人为手段抑制其他细胞的牛长,造成某一个细胞生长有利的环境条件,从而达到纯化细胞的目的。

主要有以下四种方法。

①细胞因子依赖纯化法,通过加入某些特殊的细胞因子而纯化出只依赖于这种细胞因子生长的细胞系;

②酶消化法,利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同,使两者分开,达到纯化的目的;

③机械刮除法,某种细胞以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上,可采用机械的方法去除不需要的细胞区域而保留需要的细胞区域;

④反复贴壁法,利用不同细胞贴擘附着速度不同来纯化细胞。在具体实验中可根据需要来进行一个或多个纯化方法的选择。

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