让细胞活跃的诀窍

      细胞可是许多生物学实验的主角。如果细胞心情不好，那么实验的结果也不会好到哪儿去。如何让细胞快乐？Enzo Life Sciences的科学家可有一套。资深应用科学家Morgan Mathieu在此介绍了让细胞快乐的诀窍。

1. 确保所有实验室材料都无菌

     交叉污染是细胞培养的大敌。即使是最轻微的污染，也可能毁了几个星期的成果。因培养箱内温暖潮湿，真菌极易生长，因此必须注意定期清洁。此外，在将培养瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前，应用酒精擦拭干净，以避免污染。

2. 小心处理您的培养物

      细胞培养的脆弱性怎么强调也不为过。剧烈摇晃，或连续的温度波动可能会对生长产生不利的影响。确保培养箱是水平的，温度均一，且远离电动仪器。此外，尽量避免一次处理多个细胞系，因为它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定期完成STR图谱分析，以确认细胞系的身份。

3. 在使用前正确解冻细胞

     尽管解冻看起来是个简单的步骤，但必须操作得当，以免伤害细胞。长时间暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因此，冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟，然后用条件培养基稀释，以避免DMSO造成直接伤害。

4. 使用对数生长期的细胞

       细胞培养过程共有3个阶段：停滞期、对数期和平台期，分别代表了低细胞生长、高细胞生长和无细胞生长。最有活力的细胞是健康的，快速分裂的，在对数期以70-80%的汇合度存在。

5. 在传代之前不要让细胞完全汇合

    汇合度是指贴壁细胞占据培养瓶表面积的比例。完全汇合意味着100%的表面都被贴壁细胞覆盖。一定要避免这种状态，因为它意味着细胞不能继续生长。不过，当务之急是使用活跃生长的细胞。

6. 选择最佳的培养基开发策略

      在细胞培养过程中，培养基是控制产品质量、产量和成本的最重要因素。必须针对每种培养物来定制培养基，以优化实验结果。在决定以哪种方式来开发您的培养基时，您有几个选择。您可以购买现成的，自己开发，也可以与另一家公司合作开发特定的培养基。在这个过程中，您需要考虑时间和成本等因素。