​蛋白质纯化

蛋白质纯化

Question：

RNase和多酚氧化酶都属于蛋白质，要想获得高质量、完整的RNA，必须对有蛋白质污染的样品RNA进行纯化操作。

Answer：

1.裂解液中加入蛋白质变性剂，如异硫*酸胍，，SDS等可去除大部分蛋白质。
2.可以利用蛋白酶K降解蛋白质，最后再用苯酚除去残留的蛋白质或是直接利用TRK-1002试剂盒对RNA进行后续的纯化工作。


四、次级代谢产物的纯化
次生代谢产物是指某些生物利用某些初生代谢产物为原料，在一系列酶的催化下，形成一些特殊的化学物质，这些化学物质即为次生代谢产物，这是一类非生长所必需的小分子有机化合物，但对于植物自身在复杂环境中的生存和发展起着不可替代的作用，如生物碱、黄酮类、萜类、有机酸、木质素等。

Question：
许多高等植物尤其是成熟组织能产生某些水溶性的次级代谢产物，这些产物很容易与RNA结合并被共同抽提出来，进而阻碍RNA的分离。
PS：因不确定这些代谢产物具体是什么物质，目前还没有特别好的方案来解决这一问题，不过大家可以尝试使用选择性沉淀来纯化。